摘要:
目的 通过建造兔激素性股骨头坏死模型,使用阿仑膦酸钠和唑来膦酸进行干预,观察阿仑膦酸钠和唑来膦酸能否预防兔激素性股骨头缺血性坏死,并比较两种药物的作用强弱.方法 健康28周龄新西兰大白兔90只,体重(3.8±0.3)kg,雌雄不限.随机分为阳性对照组(A组)、阿仑膦酸钠组(B组)、唑来膦酸组(C组),每组各30只.各组动物均经耳缘静脉注射10 μg/kg大肠杆菌内毒素1次,24 h后于臀肌注射20 mg/kg甲基强的松龙,共3次,每次间隔24 h;B组同时给予阿仑膦酸钠150 μg/(kg·d),共45次,颈部皮下注射;C组同时给予唑来膦酸100 μg/kg,1次/4 w,共2次,耳缘静脉注射.6 w后取双侧兔股骨头骨组织,沿正中矢状面剖为两半,一半行石蜡包埋、切片,HE染色,计算空骨陷窝率,鉴定股骨头坏死情况.另一半股骨头骨组织再剖为两半,一半提取总RNA,采用实时定量聚合酶链反应(RTQ-PCR) 技术检测OPG mRNA和RANKL mRNA的表达水平,并计算OPG/RANKL mRNA比值;一半提取骨蛋白,采用蛋白质免疫印迹法(Western blot)测出OPG和RANKL蛋白表达量,并计算OPG/RANKL比值.结果 A、B、C 3组动物死亡率分别为16.67%(5/30)、13.33%(4/30)、10%(3/30);空骨陷窝率(%)分别为26.33±1.17、20.85±1.47、18.55±2.43;股骨头坏死率分别为76.0%(19/25)、30.77%(8/26)、7.41%(2/27);RTQ-PCR检测股骨头骨组织OPG mRNA分别为0.85±0.086、1.22±0.085、1.62 ±0.097,RANKL mRNA分别为3.23±0.78、2.84±0.95、1.43±0.93;Western Blot检测股骨头骨组织OPG蛋白表达量分别为0.48±0.09、0.54±0.09、0.74±0.08;RANKL蛋白表达量分别为1.51±0.10、1.23±0.08、0.63±0.08.B、C两组股骨头坏死率低于A组,C组低于B组,差异有统计学意义(P<0.05);B组与C组比较,其OPG mRNA和蛋白表达量较低,RANKL mRNA和蛋白表达量较高,OPG/RANKL比值较低,差异有统计学意义(P<0.05).结论 唑来膦酸和阿仑膦酸钠能够有效预防兔激素性股骨头坏死的发生,其作用与对股骨头骨组织中RANKL/RANK/OPG系统的调控有关,与阿仑膦酸钠相比唑来膦酸的效果更好.