穿膜肽AR-23增强聚乙烯亚胺介导的基因转染效率及其机制的初步研究

• 作者: 季守平 李素波 檀英霞 王颖丽 马倩 高红伟 鲍国强
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 生物学
• 关键词: 蜂毒肽 穿膜肽 聚乙烯亚胺 膜穿透活性 基因转染
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 349-353
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 4551字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7644/j.issn.1674-9960.2013.05.008

摘要

目的 研究穿膜肽AR-23[蜂毒肽相关肽,来自日本蛙(Rana tagoi)]的极性电荷区对细胞穿膜作用的影响及其在促进聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI)介导的基因转染中的作用.方法 分别合成了穿膜肽AR-23及由疏水核心区组成的截短肽AR-20;利用圆二色谱(CD)分析二级结构;通过溶血实验比较两者的细胞膜穿透能力;利用去极化实验分析穿膜肽与细胞膜的相互作用方式;将穿膜肽与PEI按一定比例混合,以绿色荧光蛋白(GFP)和荧光素酶(luciferase)为报告基因检测基因在HeLa和RAW264.7细胞中的转染效率,用MTT法测定基因转染后细胞的毒性.结果 在以甲醇模拟的细胞膜环境中,AR-23呈现出典型的α-螺旋结构,α-螺旋率为37.6%,而AR-20未呈现出典型的α-螺旋结构峰;在偏酸性和中性条件下,AR-23均能穿透细胞膜导致红细胞溶血,而AR-20不具备溶血作用;AR-23对细胞膜具有较强的去极化作用,而AR-20去极化能力极弱;AR-23可明显增强PEI介导的基因在HeLa和RAW264.7细胞中的转染效率,并且不引起转染后细胞的S毒性,AR-20则不具备增强基因转染效率的作用.结论 AR-23的极性电荷区对于维持其α-螺旋结构和穿膜能力至关重要.AR-23能够提高PEI介导的基因转染效率而不会导致细胞毒性,是一种理想的基因转染增强剂.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	季守平	军事医学科学院野战输血研究所	41	231	8.0	13.0
2	鲍国强	军事医学科学院野战输血研究所	23	89	5.0	8.0
3	李素波	军事医学科学院野战输血研究所	54	223	7.0	11.0
4	高红伟	军事医学科学院野战输血研究所	35	72	4.0	6.0
5	檀英霞	军事医学科学院野战输血研究所	31	157	6.0	11.0
6	马倩	中南大学生物科学与技术学院	1	1	1.0	1.0
7	王颖丽	军事医学科学院野战输血研究所	19	74	5.0	7.0