一种红色荧光蛋白基因稳定转化的家蚕细胞株构建及应用

• 作者: 于威 张耀洲 梅文枫 聂作明 钱月忠 陈健 陈和 陈琴
• 来源期刊: 蚕业科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 红色荧光蛋白 家蚕卵巢上皮细胞 家蚕核型多角体病毒 病毒滴度 稳定转化
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 507-513
• 页数: 7页
• 分类号: Q785
• 语种: 中文

摘要

构建一种红色荧光蛋白基因稳定转化的家蚕细胞株,用于检测细胞是否被家蚕核型多角体病毒(BmNPV)感染和快速、便捷地测定BmNPV滴度.首先构建BmNPV多角体蛋白基因(polh)启动子驱动的红色荧光蛋白基因(DsRed)表达盒,然后将该表达盒克隆至pIZT/V5-His中构建稳定转化载体pIZT-DsRed并转染家蚕卵巢上皮细胞BmN,经过终浓度为300 μg/mL的博莱霉素(zeocin)筛选3个月后,最终获得DsRed稳定转化的家蚕细胞株BmN-RFP.当该细胞株感染BmNPV后,由于病毒晚期表达因子的活化引发polh启动子控制的DsRed表达,在荧光显微镜下可以观察到感染病毒的细胞发出红色荧光,因而BmN-RFP可用来指示BmNPV的感染.利用BmN-RFP细胞株,采用终点稀释法仅用3d时间即可完成BmNPV滴度的测定.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	于威		42	78	4.0	7.0
2	张耀洲		87	372	9.0	15.0
3	聂作明		31	63	5.0	6.0
4	陈和		1	0	0.0	0.0
5	陈琴		4	0	0.0	0.0
6	梅文枫		2	2	1.0	1.0
7	钱月忠		4	2	1.0	1.0
8	陈健		22	54	5.0	7.0