来氟米特干预肾小球系膜细胞Smad2的表达及Ⅳ型胶原分泌的体外研究

• 作者: 于力 张瑶 温跃强 胡雯辉 郝志宏 陈蓉燕
• 来源期刊: 广州医药
• 关键词: 系膜细胞 TGF-β1 Smad2 Ⅳ胶原 来氟米特
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 临床诊疗
• 页码范围: 1-6
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-8535.2013.03.002

摘要

目的 观察来氟米特(leflunomide,LEF)在转化生长因子β1 (TGF-β1)刺激大鼠肾小球系膜细胞(GMC)表达Smad2及Ⅳ型胶原(ColⅣ)过程中发挥的作用.方法 建立体外培养大鼠肾小球系膜细胞模型,经鉴定后第7代用于实验.按照对大鼠肾小球系膜细胞模型处理方式不同,实验分4组,对照组(只加培养液),TGF-β1组(TGF-β1 5 ng/ml),LEF-1组(LEF 5 ng/ml+TGF-β1 5 ng/ml)和LEF-2组(LEF 50 ng/ml+TGF-β1 5 ng/ml).分别于15min、30min、1h、2h和6h收集标本,用酶联免疫吸附测定(ELISA)方法测定细胞培养上清液的ColⅣ胶原蛋白表达量的变化.用间接免疫荧光法检测各组磷酸化Smad2 (P-Smad2)蛋白表达的变化；采用荧光半定量RT-PCR法检测各组Smad2 mRNA表达的变化.结果 在各时间点,TGF-β1刺激组ColⅣ分泌量高于对照组(P＜0.05),LEF各组Ⅳ胶原分泌低于TGF-β1 (P ＜0.05).对照组P-Smad2蛋白有少量的表达；TGF-β1组表达升高,有统计学意义(P＜0.05),与TGF-β1组相比,两LEF组P-Smad2表达下降,有统计学意义(P＜0.05).肾小球系膜细胞中,TGF-β1组Smad2 mRNA表达高于对照组.LEF-1组和LEF-2组Smad2 mRNA表达水平低于TGF-β1组(P＜0.01).但两LEF组间比较无统计学意义(P＞0.05).LEF干预作用有时间性,随时间延长,其LEF干预作用逐渐减弱.结论 经TGF-β1刺激后,体外培养的大鼠肾小球系膜细胞磷酸化-Smad2表达及Ⅳ胶原分泌增加,来氟米特可降低Smad2表达和Ⅳ胶原分泌水平,减轻细胞外基质(ECM)的沉积,为来氟米特的肾脏保护作用提供实验依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	于力	广州医学院附属广州市第一人民医院儿科	43	395	9.0	18.0
2	张瑶	广州医学院附属广州市第一人民医院儿科	11	26	3.0	4.0
3	郝志宏	广州医学院附属广州市第一人民医院儿科	24	132	7.0	10.0
4	温跃强	广州医学院附属广州市第一人民医院儿科	9	39	4.0	6.0
5	陈蓉燕	广州医学院附属广州市第一人民医院儿科	11	54	5.0	7.0
6	胡雯辉	广州医学院附属广州市第一人民医院儿科	3	1	1.0	1.0