混合抗体的亲和色谱分离策略

• 作者: 周月芳 孟庆雄 康丽梅 张焱 石红 罗坚 苏志国 陈毅
• 来源期刊: 色谱
• 学科: 化学
• 关键词: Protein A亲和色谱 免疫亲和色谱 重组人抗体 牛抗体 乳腺生物反应器
• 年，卷（期）: 2013,（10）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 974-979
• 页数: 6页
• 分类号: O658
• 字数: 4742字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1123.2013.03026

摘要

乳腺生物反应器可以高效表达重组人单克隆抗体,但是目标产品与乳液原料中的牛抗体性质、结构非常类似,分离难度很大.本文对牛抗体和重组人抗体的种属差异进行了分析,并在此基础上制定了新型分离策略,采取Protein A亲和色谱和免疫亲和色谱来解决混合抗体的分离问题,并讨论了色谱洗脱模式对分离效果的影响.结果表明,Protein A亲和色谱结合梯度洗脱可以有效地纯化得到混合抗体,但是难以彻底分离重组人抗体和牛抗体；相比之下,使用Protein A亲和色谱结合置换色谱模式可以更加高效地分离混合抗体,最终可以得到纯度高达95％以上的重组人抗体,回收率可达95％以上.免疫亲和色谱同样可以有效地分离纯化重组单克隆抗体,且其通用性更强,可以应用于任何动物乳腺表达重组人抗体的分离纯化中.