拟蜘蛛牵丝蛋白基因单体(S)原核表达及多克隆抗体制备

• 作者: 周欢敏 孟凡华 房君 王海涛 邢燕平 齐昱
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 拟蜘蛛牵丝蛋白基因单体(S) 原核表达 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 134-138
• 语种: 中文

摘要

利用原核表达获得的拟蜘蛛牵丝蛋白制备多克隆抗体,将为我们在真核水平检测其表达情况奠定基础.以质粒pGEX-2T为骨架载体,在其多克隆位点处连接人工合成的拟蛛丝蛋白基因单体(S),构建含有GST标签的融合蛋白原核表达载体pGEX-S;利用IPTG诱导重组质粒pGEX-S在大肠杆菌感受态细胞BL21中表达,并利用GST标签亲和纯化重组蛋白,获得的S-GST蛋白与佐剂混合后,采用多点皮下免疫注射8只健康的CD I小白鼠,免疫期结束后收集抗血清进行ELISA检测.序列分析后,确定原核表达载体pGEX-S编码正确；诱导表达后,Western blot检测显示在41 kD处有重组蛋白条带出现,与我们预期的结果相符；抗血清Elisa检测显示有2只小鼠A和F抗血清效价较高.采用原核表达生产的拟蜘蛛牵丝蛋白成功制备了多克隆抗体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孟凡华	内蒙古农业大学生命科学学院	14	25	3.0	4.0
2	周欢敏	内蒙古农业大学生命科学学院	86	473	10.0	19.0
3	邢燕平	内蒙古农业大学生命科学学院	13	14	3.0	3.0
4	齐昱	内蒙古农业大学生命科学学院	7	8	2.0	2.0
5	房君	内蒙古农业大学生命科学学院	7	11	3.0	3.0
6	王海涛	内蒙古农业大学生命科学学院	5	11	3.0	3.0