油松苯丙氨酸解氨酶基因原核表达载体的构建及表达分析

• 作者: 徐华 樊军锋 魏宁
• 来源期刊: 西北林学院学报
• 关键词: 油松 苯丙氨酸解氨酶 原核表达 分析
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 所属期刊栏目: 林木遗传育种与培育
• 页码范围: 95-99
• 页数: 5页
• 分类号: S791.254
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-7461.2013.05.18

摘要

利用基因重组技术,以油松PAL基因(TaPAL) CDS区(2 157 bp)作为外源基因的同源重组片段,构建了pET-28a-TaPAL重组表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中融合表达并进行分析.经SDS-PAGE电泳检测,在分子量80 KD处获得一条特异蛋白的表达条带,且其大小与预期相符.在温度28℃,IPTG浓度1.5 mmol· L-1,时间3h条件下,重组质粒的表达量最大.可溶性分析表明,在最佳诱导条件下,该蛋白主要以包涵体形式存在.粗酶活性测定表明,粗酶(在20℃、IPTG浓度1 mm01·L-1条件下诱导10 h)比活力为55.3μmol·min-1·gpro-1,即55.3U·g-1.构建的pET-28a-TaPAL重组载体能够在大肠杆菌BL21(DE3)中表达出具有生物活性的融合蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	樊军锋	西北农林科技大学林学院	121	1262	19.0	26.0
2	魏宁	西北农林科技大学林学院	21	69	4.0	8.0