家蝇Denfensin-1基因的克隆、诱导表达及启动子活性分析

• 作者: 卢丹 唐婷 柳峰松 王凡 王欣欣 郑立
• 来源期刊: 昆虫学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 家蝇 先天免疫 抗菌肽 防御素 基因克隆 启动子
• 年，卷（期）: 2013,（8）
• 所属期刊栏目: 生理与生化
• 页码范围: 854-863
• 分类号: Q966
• 语种: 中文

摘要

[目的]鉴定一种新的家蝇Musca domestica防御素基因,并分析其功能.[方法]从家蝇转录组数据库中鉴定了1条新的防御素基因cDNA序列,并将其命名为家蝇防御素1(Md-defensin-1)基因Mdde-1.利用生物信息学网站、软件预测其结构等信息.以实时荧光定量PCR技术研究该基因的表达模式,并且利用基因步移技术获得了启动子序列,同时采取细胞转染技术验证Mdde-1启动子活性.[结果]该序列包含一个276 bp的开放阅读框,编码91个氨基酸残基.推导的氨基酸序列N端包括1个23个氨基酸残基的信号肽和1个28个氨基酸残基的前肽.成熟肽由40个氨基酸残基组成,含有1个典型的CSαβ基序.实时荧光定量PCR结果显示,家蝇2龄幼虫受金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus (G+)刺激后Mdde-1表达明显上调,而大肠杆菌Escherichia coli(G)刺激后表达下调;Mdde-1在家蝇幼虫受到热激时呈上调表达.为进一步研究其调控机制,克隆了Mdde-1启动子,并证明了该启动子具有活性.[结论]据此认为Mdde-1是一种新的家蝇防御素,并且在免疫革兰氏阳性菌方面发挥重要作用;同时我们首先证明了 Mdde-1的启动子具有活性.本研究为进一步研究家蝇防御素的作用机制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	唐婷	河北大学生命科学学院	20	116	8.0	10.0
2	柳峰松	河北大学生命科学学院	46	280	9.0	14.0
3	王欣欣	河北大学生命科学学院	8	15	2.0	3.0
4	郑立	河北大学生命科学学院	3	21	2.0	3.0
5	王凡	河北大学生命科学学院	13	20	2.0	4.0
6	卢丹	河北大学学生处	1	9	1.0	1.0