直接免疫荧光法和实时荧光定量PCR法检测汉坦病毒效果的比较

• 作者: 余鹏博 关路媛 卢晓玲 李慎 杜水泉 董建华 郑媛 马长安 魏菁
• 来源期刊: 中华预防医学杂志
• 关键词: 汉坦病毒 荧光抗体技术,直接 聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 检验技术
• 页码范围: 367-370
• 页数: 4页
• 字数: 2738字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0253-9624.2013.04.017

摘要

目的 比较直接免疫荧光法(DFA)和实时荧光定量PCR法检测鼠肺汉坦病毒(HV)带毒效果的差异.方法 于2012年4-10月在陕西省户县、泾阳县和眉县3个肾综合征出血热(HFRS)高发县的居民区和野外鼠类活动地,采用鼠夹法捕获野鼠和家鼠共479只.解剖取鼠肺,1份鼠肺经冰冻切片后免疫荧光染色检测HV抗原,另l份经抽提组织RNA后应用实时荧光定量PCR法检测HV核酸.比较2种方法的病毒阳性检出率和检测结果的一致性.结果 捕获的479只鼠中,包括家鼠105只、野鼠374只.DFA和实时荧光定量PCR两种方法在家鼠肺中均未检出HV,而DFA法检测野鼠带毒率为13.1％ (49/374),实时荧光定量PCR法检测野鼠带毒率为14.7％(55/374),差异无统计学意义(x2=0.402,P=0.526).对每份鼠肺标本分别检测,DFA法检测鼠肺HV带毒率为10.2％(49/479),实时荧光定量PCR法检测带毒率为11.5％ (55/479),两种方法比较差异无统计学意义(x2=1.286,P=0.257),检测结果Kappa一致性系数(K)为68.2％,两种方法结果有高度一致性(u =11.759,P＜0.05).以DFA法为标准,实时荧光定量PCR法在检测鼠肺HV的灵敏度为77.6％(38/49),特异度为96.1％ (413/430).DFA检测的9个疑似阳性结果中6个被实时荧光定量PCR方法证实,3个被否定.结论 与DFA法相比,实时荧光定量PCR法同样可用于检测鼠肺中HV带毒率,而且结果更稳定.