F8基因大片段缺失所导致的一例重型血友病A的分子发病机制研究

• 作者: 丁秋兰 张利伟 戴菁 游国岭 王学锋 王鸿利 许冠群 陆晔玲
• 来源期刊: 中华检验医学杂志
• 关键词: 血友病A 因子Ⅷ 突变 外显子 多重聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 534-537
• 页数: 4页
• 字数: 3171字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2013.06.013

摘要

目的 对F8基因大片段缺失所导致的重型血友病A患者进行基因断裂点分析,探讨其分子发病机制.方法 筛查患者凝血功能相关指标,明确血友病A表型诊断.采用长距离PCR及序列特异PCR进行内含子22和内含子1倒位的检测,并对F8基因的所有外显子及其侧翼序列直接测序.基因步移的方法确定F8基因断裂点.断裂点特异双重PCR对携带者进行诊断.多重荧光PCR法检测6个微卫星DNA位点(F8Up226、F8Up146、F8Int13、F8Int25、F8Down48、DXS1073)多态性对家系进行遗传连锁分析验证.结果 先证者FⅧ活性＜1％,诊断为重型血友病A.患者F8内含子22及内含子1倒位均为阴性.F8基因4～7号外显子多次PCR扩增后电泳未见相应条带,其余外显子测序未发现突变.基因步移PCR扩增产物经测序发现F8基因共缺失27 685个碱基,并在断裂点融合处存在2个微小同源碱基,且插入7个碱基(CTCTTrCC).断裂点特异性双重PCR结果显示胎儿及该患者的女儿均为缺失携带者,与基因连锁分析结果相吻合.结论 F8基因4～7号外显子缺失导致患者发生重型血友病A,微小同源介导的末端连接等机制可能介导了缺失的发生.断裂点特异双重PCR为携带者的诊断提供了一个可靠的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	丁秋兰	上海交通大学医学院附属瑞金医院检验科	61	169	6.0	10.0
2	王学锋	上海交通大学医学院附属瑞金医院检验科	126	552	10.0	18.0
3	张利伟	上海交通大学医学院附属瑞金医院检验科	8	45	4.0	6.0
4	戴菁	上海交通大学医学院附属瑞金医院检验科	32	103	6.0	8.0
5	陆晔玲	上海交通大学医学院附属瑞金医院检验科	19	65	5.0	7.0
6	许冠群	上海交通大学医学院附属瑞金医院检验科	16	28	4.0	4.0