基于颜色判定的环介导恒温扩增法快速检测结核分枝杆菌

• 作者: 刘威 尹志涛 李娜 熊鸿燕 袁静 邹大阳 黄留玉
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 医学
• 关键词: IS6110 环介导的恒温核酸扩增法(LAMP) 快速检测 结核分枝杆菌
• 年，卷（期）: 2013,（8）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 619-623
• 页数: 5页
• 分类号: R446.5
• 字数: 4670字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7644/j.issn.1674-9960.2013.08.014

摘要

目的 建立快速检测结核分枝杆菌环介导的恒温扩增法.方法 针对结核分枝杆菌特异性保守靶序列IS6110,采用环介导的恒温扩增法(LAMP)引物设计原则设计6条引物,特异性识别靶基因序列上8个独立区域.LAMP反应过程中会产生焦磷酸镁白色沉淀,可以通过实时监测反应液浊度来判断反应结果.结果 试验表明,在60～ 65℃恒温条件下,LAMP反应60 min内即可完成；如果在反应前添加钙黄绿素,可通过反应液颜色的变化来判断反应结果；LAMP方法的最低检出核酸浓度为101 pg/μl,其灵敏度是PCR方法最低检出浓度1.01 ng/μl的10倍,且具有良好的特异性.结论 LAMP方法检测结核分枝杆菌具有简单、快速、价廉、特异性强、灵敏度高等特点,适用于疾控工作及临床筛查或快速检测结核杆菌.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	熊鸿燕		157	1190	18.0	26.0
2	黄留玉	军事医学科学院疾病预防控制所	86	1108	18.0	30.0
3	袁静	军事医学科学院疾病预防控制所	34	178	7.0	11.0
4	尹志涛		4	9	2.0	3.0
6	李娜		16	53	5.0	6.0
7	刘威	军事医学科学院疾病预防控制所	11	115	4.0	10.0
10	邹大阳	军事医学科学院疾病预防控制所	7	25	3.0	5.0