转植酸酶基因玉米phyA2基因标准质粒分子构建及其检测应用

• 作者: 孙红炜 张广远 李凡 杨淑珂 赵蕾 路兴波
• 来源期刊: 作物学报
• 关键词: 转植酸酶基因玉米 质粒分子 TaqMan探针
• 年，卷（期）: 2013,（8）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 1501-1506
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1006.2013.01501

摘要

质粒分子以其良好的适应性被较多地用作转基因标准材料的替代品.本文根据转植酸酶基因玉米phyA2基因设计引物与探针,并构建了一种包含phyA2基因片段(243 bp)和内标基因片段(178 bp)的质粒分子pPZ.选取不同转基因模板DNA作用于phyA2特异性引物,PCR结果显示只有转植酸酶基因玉米出现131 bp的目的条带;选取不同转基因作物检测体系作用于质粒分子pPZ,只有以pPZ DNA为模板时出现目的条带(131 bp和88 bp).同时采用pPZ质粒分子和转基因玉米阳性基因组DNA为标准对4个转植酸酶基因玉米混合样品(3.0％、1.0％、0.5％和0.1％)进行定量检测,t检验表明,2种标准产生的斜率、线性相关系数和定值结果没有显著差异.这些结果表明,pPZ质粒分子可以作为转植酸酶基因玉米替代品用于定性和定量检测.