脑出血后血红蛋白对血脑屏障内皮细胞Rho激酶Ⅱ及紧密连接蛋白claudin-5的影响

• 作者: 付正浩 姜晓丹 李兵 杨硕 蒋伟平 邓心情 陈祎招
• 来源期刊: 中华神经医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 脑出血 血红蛋白 血脑屏障 Rho激酶Ⅱ 紧密连接蛋白claudin-5
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 555-560
• 页数: 6页
• 分类号: R743.34
• 字数: 5469字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1671-8925.2013.06.004

摘要

目的 探讨脑出血后血红蛋白对血脑屏障内皮细胞Rho激酶Ⅱ及紧密连接蛋白claudin-5的影响. 方法 将SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组(18只)和血红蛋白组(72只),血红蛋白组再按不同取材时间点分为24 h、48 h、3d、7d4个亚组(每个时间点18只).血红蛋白组采用脑内注入血红蛋白法制作脑出血大鼠模型.免疫组化染色观察各组大鼠血脑屏障内皮细胞Rho激酶Ⅱ及磷酸化肌球蛋白轻链的蛋白表达,伊文思蓝浓度测定评估血脑屏障通透性,免疫荧光染色和实时荧光定量PCR检测claudin-5蛋白和mRNA表达. 结果 免疫组化染色结果显示:正常对照组血脑屏障内皮细胞Rho激酶Ⅱ及磷酸化肌球蛋白轻链表达较少,血红蛋白组血肿侧血脑屏障内皮细胞呈棕黄色及线条状表达；血红蛋白组48 h、3d时血脑屏障内皮细胞Rho激酶Ⅱ及磷酸化肌球蛋白轻链平均吸光度值明显高于正常对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).血红蛋白组各时间点脑内伊文思蓝含量均明显高于正常对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).免疫荧光染色结果显示:与正常对照组相比,血红蛋白组24h、48 h及3d时claudin-5蛋白表达断续和减少.实时荧光定量PCR结果显示:血红蛋白组24 h、48 h、3d及7d时claudin-5 mRNA表达水平明显低于正常对照组,差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 脑出血后血红蛋白可以导致血脑屏障内皮细胞Rho激酶Ⅱ的表达增高,进而致磷酸化肌球蛋白轻链表达增加、紧密连接蛋白claudin-5表达降低,其可能是导致脑出血后血脑屏障破坏及脑水肿发生的重要机制之一.