抑制小鼠HL-1心肌细胞桥粒斑蛋白基因表达对缝隙连接蛋白43结构和功能的影响

• 作者: 刘晓颖 吴书林 张黔桓 朱杰宁 谭虹虹 邓春玉 饶芳 麦丽萍
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 缝隙连接蛋白43 桥粒斑蛋白 基因沉默 HL-1细胞
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 982-987
• 页数: 6页
• 分类号: R542.2
• 字数: 4767字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2013.06.004

摘要

目的:采用基因沉默技术抑制小鼠HL-1心肌细胞桥粒斑蛋白(DSP)基因表达以明确DSP与缝隙连接蛋白43(Cx43)的结构和功能关系.方法:用基因沉默技术抑制DSP基因的表达,Western blotting和流式细胞术检测HL-1细胞DSP和Cx43蛋白的表达,用双免疫荧光方法检测DSP与Cx43蛋白的表达与定位情况,并用划痕标记染料示踪技术检测细胞缝隙连接通讯状况.结果:与空白组和对照组相比,siRNA-DSP组的DSP和Cx43蛋白表达量降低(P＜0.05).免疫荧光检测发现空白组和对照组DSP与Cx43蛋白存在共定位情况,而siRNA-DSP组DSP和Cx43蛋白共定位遭到破坏,Cx43蛋白出现再分布,在细胞内检测到Cx43蛋白,并且划痕标记染料示踪技术检测发现siRNA-DSP组Lucifer yellow通过HL-1细胞缝隙连接的传输功能降低.结论:DSP表达抑制不仅使Cx43出现再分布,而且影响缝隙连接传导功能.