一种快速的水稻不同组织总蛋白提取方法

• 作者: 张武君 苏军 陈在杰
• 来源期刊: 福建农业学报
• 学科: 医学
• 关键词: 水稻 总蛋白提取 Western Blot
• 年，卷（期）: 2013,（9）
• 所属期刊栏目: 作物科学
• 页码范围: 884-887
• 页数: 4页
• 分类号: R284
• 字数: 3357字
• 语种: 中文

摘要

介绍一种简单快捷的水稻不同组织总蛋白提取方法。该方法采用预冷甲醇和丙酮依次洗涤去除杂质和次生代谢干扰物，同时在甲醇洗涤步骤中加入蛋白酶抑制剂混合液，能够最大限度地包含所有蛋白质并降低蛋白酶的降解作用，提高蛋白质的质量和产量。采用该方法从水稻的根、茎、叶及发育中的种子中提取粗蛋白，产量为20～99 mg ? g -1 FW ，提取蛋白整个过程耗时1.6 h 。以 SDS-PAGE 胶及 Western Blot 检测所提总蛋白的质量，分别用核蛋白、胞浆蛋白、膜蛋白以及淀粉结合型蛋白等不同类型蛋白抗体进行 Western Blot 检验。结果显示采用该方法所分离的总蛋白质量可以满足水稻不同类型蛋白对 Western Blot 的质量要求。