海藻酸微囊法冷冻保存绵羊精原干细胞

• 作者: 刘代艳 包佳婧 吴应积 孔群芳 罗奋华
• 来源期刊: 中国细胞生物学学报
• 关键词: 海藻酸微囊 绵羊精原干细胞 冷冻保存 活率
• 年，卷（期）: 2013,（11）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1603-1609
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.11844/cjcb.2013.11.0191

摘要

细胞冷冻保存技术是动物研究的重要组成部分.该研究首次应用海藻酸微囊冷冻保存绵羊精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs),旨在提高绵羊SSCs的冷冻保存效率.冻存前后对绵羊SSCs存活率进行评估,在绵羊SSCs液氮冻存10 d后进行细胞培养和CDH1、PLZF、GFRα1、OCT-4、Thy-1五个精原干细胞特异分子标记蛋白的免疫荧光鉴定.结果表明,在液氮冻存1d后,绵羊SSCs存活率从58.4％±1.4％(单细胞悬液冻存组)提高到78.7％±1.3％(海藻酸微囊包埋冻存组);液氮冻存10d后,单细胞悬液冻存组细胞存活率降低至48.1％±0.8％,而海藻酸微囊包埋组细胞存活率仍保持在78.0％±1.5％.对液氮冻存10d后的细胞进行体外培养,培养4d后,海藻酸微囊包埋冻存组能形成典型的精原干细胞簇.进行细胞免疫荧光鉴定,发现在微囊包埋冻存10d后CDH1、PLZF、GFRα1、OCT-4、Thy-1均显示阳性.海藻酸微囊的应用显著提高了绵羊SSCs的冷冻保存效率,且对绵羊SSCs的标记基因表达无显著影响.该方法的建立为其他家畜及濒危动物种质资源保存提供了依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴应积		30	268	7.0	16.0
2	罗奋华		24	199	6.0	14.0
3	刘代艳		4	14	2.0	3.0
4	孔群芳		3	9	1.0	3.0
5	包佳婧		3	9	1.0	3.0