栖热袍菌α-葡糖苷酶的基因克隆表达及酶学性质

• 作者: 刘琼 张雪 曲宁宁 李大军 毕云枫* 陈丽丽
• 来源期刊: 食品与发酵科技
• 学科: 工学
• 关键词: pET-28a α-葡糖苷酶 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 页码范围: 4-7
• 分类号: TQ925+·5
• 字数: 3425字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-506X.2013.01-002

摘要

用分子克隆手段获得栖热袍菌(Thermotoga neapolitana DSM 4359)中的α-葡糖苷酶基因,构建该基因的原核表达载体,并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达.以Thermotoga neapolitana DSM 4359的α-葡糖苷酶基因DNA为模板,通过PCR扩增目的基因,并连接至表达载体中,构建重组质粒pET-28a-glu,然后转化到大肠杆菌中,加IPTG诱导获得重组蛋白.提取粗酶,用葡萄糖测定试剂盒测酶活.序列分析结果表明,该基因的读码框碱基长度为2166bp,编码722个氨基酸;SDS-PAGE电泳结果表明,α-葡糖苷酶基因在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达,蛋白分子量约为62KDa;酶的最适反应温度为70℃,最适pH为5.0.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李大军	吉林农业大学食品科学与工程学院	48	115	6.0	8.0
2	张雪	吉林农业大学食品科学与工程学院	26	51	3.0	5.0
3	陈丽丽	吉林农业大学食品科学与工程学院	4	11	2.0	3.0
4	曲宁宁	吉林农业大学食品科学与工程学院	4	15	3.0	3.0
5	刘琼	吉林农业大学食品科学与工程学院	8	18	3.0	4.0
6	毕云枫*	吉林农业大学食品科学与工程学院	1	0	0.0	0.0