牛病毒性腹泻病毒E2基因在昆虫细胞中的表达

• 作者: 刘加波 庞耀珊 罗思思 范晴 谢丽基 谢志勤 谢芝勋 邓显文
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 生物学
• 关键词: 牛病毒性腹泻病毒 E2蛋白 杆状病毒表达体系 昆虫细胞
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 9-12
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 字数: 3428字
• 语种: 中文

摘要

为了获得具有良好抗原性的牛病毒性腹泻病毒E2囊膜蛋白,利用PCR方法扩增牛病毒性腹泻病毒E2基因,连接于昆虫杆状病毒表达载体中,构建pFastBacHTA-E2重组质粒.将该重组质粒转化入DH10BAC感受态细胞,经PCR鉴定获得转座杆粒Bacmid-E2.转座杆粒Bacmid-E2转染sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒,感染细胞后,收获得到目的蛋白,用SDS-PAGE和Western blot对重组的表达蛋白进行分析.结果表明,重组E2蛋白大小为43.6 ku,与预期值相符,该蛋白能与牛病毒性腹泻病毒阳性血清发生特异性反应,为进一步研发牛病毒性腹泻病毒ELISA抗体检测试剂盒奠定基础.