肽聚糖对树突细胞分泌促炎性细胞因子以及实验性自身免疫性葡萄膜炎辅助性T细胞17的影响

• 作者: 刘勋 张晓敏 李筱荣 李雪 粘红 肖青 魏瑞华
• 来源期刊: 中华眼底病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肽聚糖/药理学 葡萄膜炎/病理生理学 Toll样受体2 T细胞抗原受体特异性 Th17细胞
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 600-604
• 页数: 5页
• 分类号: R773.9
• 字数: 4303字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1005-1015.2013.06.012

摘要

目的 观察肽聚糖(PGN)对树突细胞(DCs)分泌促炎性细胞因子的影响以及对实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)辅助性T细胞(Th)17(Th17细胞)反应的调控.方法 利用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子、白细胞介素(IL)-4(IL-4)定向诱导健康小鼠骨髓细胞向DCs分化.诱导分化的第6天将DCs分为对照组与实验组,实验组加入PGN干预,对照组加入等量无菌磷酸缓冲盐溶液,培养24 h后利用实时荧光逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测2组培养细胞中Th17细胞分化相关的细胞因子IL-23、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-6、IL-1β mRNA相对表达量.采用光感受器间维生素A类结合蛋白(IRBP) 1-20多肽片段(IRBP1-20)和弗氏不完全佐剂及结核分枝杆菌H37RA免疫C57BL/6小鼠.免疫后13d分离EAU模型鼠脾脏和淋巴结的IRBP1-20特异的T细胞与经PGN干预或未干预的DCs共培养.收集共培养后2d的细胞,实时荧光RT-PCR检测维甲酸相关孤儿受体γt(RORγt)、IL-17、T-bet、γ干扰素(IFN-γ)mRNA相对表达量;此外,收集共培养后2、5、7d的细胞分别进行流式细胞仪分析,观察Th17、Th1细胞的变化.结果 实时荧光RT-PCR检测结果显示,实验组DCs经PGN干预后IL-23、IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA相对表达量较对照组显著升高,差异有统计学意义(t=-14.363、-5.627、-3.85、-28.151;P＜0.05);实验组RORγt、IL-17 mRNA相对表达量较对照组显著升高(t=-5.601、-19.76;P＜0.05),而T-bet、IFN-γmRNA相对表达量较对照组显著降低(t=4.717、11.207;P＜0.05).流式细胞仪检测结果显示,与对照组相比,实验组的DCs与T细胞共培养后2、5、7d,IL-17+细胞的百分比升高(t=-2.944、-3.03、-4.81;P＜0.05),而IFN-γ-细胞的比例变化不大(t=-1.25、-0.18、-2.16;P＞0.05).结论 PGN能够刺激DCs分泌IL-23、TNF-α、IL-6及IL-1β等Th17细胞分化相关的细胞因子,促进EAU中Th17细胞的分化和增生.