大肠杆菌细胞抽提物制备方案的简化与优化

• 作者: 权春善 王丽娜 范圣第 赵朋超 郭新娟
• 来源期刊: 生物工程学报
• 关键词: 蛋白质表达 无细胞表达系统 细胞抽提物 大肠杆菌 体外表达
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 生物育种与工艺优化
• 页码范围: 532-535
• 语种: 中文

摘要

无细胞蛋白表达系统是一种将目的蛋白在体外进行表达的新技术和新方法,已广泛应用到蛋白质组学、蛋白质结构和功能等领域的研究中.在无细胞蛋白表达系统中,细胞抽提物的制备是关键因素之一.通过对大肠杆菌细胞抽提物制备过程中离心速度、预孵化和透析等参数的考察,利用绿色荧光蛋白作为报告蛋白,可以得到一个细胞抽提物制备的简化方案.采用相对低的转速(12 000×g,10 min),简易空孵化即可制备出活性高的细胞抽提物,用于无细胞体系蛋白表达,其表达的绿色荧光蛋白产量为209 μg/mL.与传统的大肠杆菌细胞抽提物S30相比较,新方案将使时间与成本节省62％,产量是传统方法的2.6倍,使无细胞蛋白表达技术的操作快速、高通量的优势更加明显.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王丽娜	中国科学院大连化学物理研究所	51	611	15.0	22.0
5	赵朋超	中国科学院大连化学物理研究所	4	67	2.0	4.0
9	郭新娟	中国科学院大连化学物理研究所	1	2	1.0	1.0