异鼠李素和阿魏酸在大鼠原代肝细胞的肝摄取性质

• 作者: 原梅 庄笑梅 李桦 沈国林 谭妍 高月
• 来源期刊: 中国药理学与毒理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 异鼠李素 阿魏酸 肝细胞 生物转运,主动
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 411-417
• 页数: 7页
• 分类号: R96
• 字数: 4971字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3867/j.issn.1000-3002.2013.03.018

摘要

目的 建立大鼠原代肝细胞摄取模型,评价异鼠李素和阿魏酸的肝细胞摄取性质.方法 应用RT-qPCR技术测定0,0.5,2和4h悬浮培养原代大鼠肝细胞上摄取转运体有机阴离子转运多肽(Oatp)1和Oatp2,有机阴离子转运体(Oat)2和有机阳离子转运体(Oct)1的mRNA表达.应用已知底物非索非那定、普伐他汀、甲氨蝶呤和阿昔洛韦评价转运体的功能.将已知底物或受试药物在4℃和37℃分别与肝细胞孵育不同时间,LC-MS/MS定量测定细胞摄取量,考察温度和时间对底物摄取的影响.由浓度依赖的摄取实验,计算得到Km、Vmax和主动摄取率等参数.在肝细胞模型上,将转运体的阳性抑制剂与异鼠李素10 μmol·L-1和阿魏酸50 μmol· L-1共孵育2 min,观察抑制剂对受试药转运的影响.结果 悬浮培养大鼠原代肝细胞上表达有转运体Oatp1,Oatp2,Oat2和Oct1,并能介导已知底物的主动摄取.转运体的mRNA表达水平随着时间的延长而快速下降,4h的表达水平约为0h的10％.转运体对已知底物摄取活性也随时间呈下降趋势,但程度显著低于表达水平,4h的活性约为0h的28.7％ ～71.4％.在经验证的肝细胞模型上,异鼠李素的4℃和37℃摄取无显著差异,主动转运率为14.6％.阿魏酸在37℃的摄取量显著高于4℃,主动转运率为84.1％；Oct阳性抑制剂奎尼丁100 μmol· L-1能显著抑制阿魏酸的肝摄取,抑制率为64.9％.结论 成功建立了大鼠原代肝细胞摄取模型,并用底物进行了验证.异鼠李素通过被动扩散进入肝细胞,阿魏酸的肝细胞摄取则以主动转运为主.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高月	军事医学科学院放射与辐射医学研究所药理毒理研究室	102	2247	28.0	43.0
2	李桦	军事医学科学院毒物药物研究所药物代谢研究室	31	280	10.0	15.0
3	原梅	军事医学科学院毒物药物研究所药物代谢研究室	14	82	5.0	8.0
4	庄笑梅	军事医学科学院毒物药物研究所药物代谢研究室	21	162	7.0	11.0
5	谭妍	军事医学科学院毒物药物研究所药物代谢研究室	3	16	2.0	3.0
6	沈国林	军事医学科学院毒物药物研究所药物代谢研究室	6	55	5.0	6.0