嗜肺军团菌实时荧光定量PCR快速检测方法的建立

• 作者: 宋宏彬 庄妤冰 杜昕颖 王玉飞 苏晓 苑锡铜 袁静 陈泽良 黄留玉 龚春丽
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 嗜肺军团菌 荧光定量PCR TaqMan探针 Mip基因
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 843-846
• 页数: 4页
• 分类号: Q789
• 字数: 3676字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2013.06.022

摘要

目的：建立针对嗜肺军团菌Mip基因的实时荧光定量TaqMan PCR检测方法，并进行自来水和空调冷却水模拟标本的检测评价。方法：根据嗜肺军团菌Mip基因的特异性序列设计引物和TaqMan探针，建立嗜肺军团菌的实时荧光定量TaqMan PCR快速检测方法，对方法进行灵敏度及特异性评价，并对自来水和空调冷却水模拟标本中的嗜肺军团菌进行检测。结果：建立的方法对嗜肺军团菌的检测具有高度特异性，与3种非嗜肺军团菌和6种其他呼吸道病原均没有交叉反应；基因组DNA的检测灵敏度为1.6 pg/μL，模拟自来水和空调冷却水标本的检测灵敏度为10 CFU/mL。结论：建立的TaqMan荧光定量PCR方法特异、灵敏、快速，适于嗜肺军团菌的日常监测和暴发疫情的应急诊断。