β-1,3-1,4-葡聚糖酶在毕赤酵母中的克隆与表达

• 作者: 林戎斌 林新坚 陈亚兰 陈济琛 陈龙军
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: 毕赤酵母X-33 β-1,3-1,4-葡聚糖酶 诱导
• 年，卷（期）: 2013,（10）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 170-174
• 分类号: TS201.3
• 语种: 中文

摘要

β-1,3-1,4-D-葡聚糖酶是一类专一性降解β-1,3-1,4-葡糖苷键中的β-1,4-糖苷键,产生小分子还原糖的水解酶,广泛应用于啤酒工业和饲料工业中.本研究根据毕赤酵母密码子偏好性优化β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因序列,采用PCR法将其插入毕赤酵母表达载体pPICZαA,经Sac I线性化后电击整合入毕赤酵母X-33基因组,构建重组酵母；经菌落PCR验证和摇瓶筛选,获得一株X-33/pPICZαA-bgl,甲醇诱导96h后,酶活力达308.5U/mL,经SDS-PAGE电泳,实际蛋白分子量约为33ku.β-1,3-1,4-D-葡聚糖酶最适反应pH为5.0,最适反应温度为50℃.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林戎斌	福建省农业科学院土壤肥料研究所	48	398	10.0	17.0
2	陈济琛	福建省农业科学院土壤肥料研究所	88	786	15.0	23.0
3	林新坚	福建省农业科学院土壤肥料研究所	186	2041	26.0	33.0
4	陈亚兰	厦门大学化学化工学院	4	15	2.0	3.0
5	陈龙军	福建省农业科学院土壤肥料研究所	12	21	3.0	3.0