拟穴青蟹β-肌动蛋白基因的克隆、组织表达及作为内参的可靠性分析

• 作者: 冯娜娜 徐真 李新苍 李淑娟 蒋伟 马凌波 马春艳 马洪雨
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 拟穴青蟹 β-肌动蛋白基因 基因克隆 组织表达 内参
• 年，卷（期）: 2013,（8）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 105-112
• 语种: 中文

摘要

采用RT-PCR和RACE技术,从拟穴青蟹肌肉组织中鉴定出β-actin基因的cDNA全序列.序列分析结果表明,拟穴青蟹β-actin基因全长1 434bp,包括完整的开放阅读框1 131 bp、5’端非翻译区60bp及3’端非翻译区243 bp.该基因编码376个氨基酸,蛋白分子量为41.79 kD,等电点为5.205.同源性比较表明,该基因与其它物种具有高度的氨基酸保守性.聚类分析表明,拟穴青蟹与百慕大陆蟹的亲缘关系最近.荧光定量PCR分析表明,β-actin基因在拟穴青蟹血液、心脏、肝胰腺、胃、鳃、肌肉、精巢、结缔组织组织中均有表达,在肌肉组织中的表达量最高,在胃、精巢、血液、肝胰腺、心脏、鳃组织中的表达量依次降低,在结缔组织中的表达量最低.由于该基因在拟穴青蟹不同组织中的表达量存在明显的差异,因此不适用于作为内参基因使用.