冷冻对父源印记基因H19DNA甲基化影响的长时程效应研究

• 作者: 张永琦 李博 李建波 李超波 梁新新 王晓红* 闵保华 马夜肥
• 来源期刊: 中国男科学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 后成说,遗传 DNA甲基化 基因组印迹 精液保存
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 页码范围: 3-9
• 分类号: R394.113|R321.1
• 字数: 4396字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0848.2013.03.001

摘要

目的检测冷冻及冷冻时间长短对精子的父源印记基因H19印记控制区域(ICR)的DNA甲基化程度的影响.方法以15例健康男性精液为研究对象,将每份精液样品除留少许作为对照外,其余分为两部分(每部分又等分为若干份),一部分连同精浆一起进行程序化冷冻,另一部分则去除精浆后冷冻,并分别于冷冻后1个月、3个月和6个月时,通过亚硫酸氢盐测序PCR的方法分析H19ICR的DNA甲基化状态.结果连同精浆一起冷冻的精子样品,冷冻1个月、3个月和6个月后,H19ICR的 DNA甲基化丢失率分别为(13.62±2.06)%、(14.88±1.96)%和(15.89±2.26)%,与对照相比(12.74±2.85)%差异无统计学意义(P>0.05);去除精浆后冷冻的精子样品,冷冻1个月、3个月后,H19ICR的 DNA甲基化丢失率分别为(15.24±1.91)%、(13.49±2.63)%,与对照相比差异无统计学意义(P>0.05),而冷冻6个月后,H19ICR的 DNA甲基化丢失率高达(30.92±3.08)%,差异极显著(P<0.01).结论程序化冷冻对精子H19DNA甲基化的影响具有长时程的累积效应,本研究为少精子症患者或者无精子症患者通过经附睾精子抽吸术(PESA)取精后的精子冷冻保存的安全期限提供了一定的参考依据.