发生马铃薯立枯病土壤中立枯丝核菌的荧光定量PCR快速检测

• 作者: 刘星 张俊莲 张文明 张春红 李瑞琴 沈其荣 王蒂 邱慧珍
• 来源期刊: 草业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 连作马铃薯根际土壤 立枯丝核菌 实时荧光定量PCR 动态变化趋势
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 136-144
• 页数: 9页
• 分类号: S154.38|S435.32
• 字数: 6760字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11686/cyxb20130516

摘要

连作马铃薯根际土壤中立枯丝核菌的大量累积可能是导致马铃薯连作障碍发生的主要原因之一.为了解根际土壤中土传病害病原菌的积累与连作障碍之间的关系,进一步寻求缓解和克服马铃薯连作障碍土传病害的有效途径,本研究建立优化了荧光定量PCR(real-time PCR)方法,对引起马铃薯立枯病的病原菌立枯丝核菌进行了快速监测和绝对定量,对马铃薯连作1～5年根际土壤立枯丝核菌的动态变化趋势进行了检测分析.结果显示,研究建立优化的荧光定量PCR检测方法,可直接应用土壤DNA进行病原菌的定量检测,能检测到土壤中浓度为1×102个拷贝/g土的马铃薯立枯丝核菌,扩增效率为1.04,具有检出限低、扩增效率高的特点,实现了不通过病土分离培养方法,就可掌握病原菌在根际土壤中的累积状况；在马铃薯立枯病发病严重的连作根际土壤中,立枯丝核菌的累积数量随连作年限的递增呈上升趋势；病原菌的累积随生育进程的推进呈下降趋势；病原菌累积量最大的是连作5年的播前土壤,每g土壤达3.75×107个拷贝数,由此可见,连作导致了土壤微生物种群结构发生改变,土壤致病真菌数量增加,相应地也增加了马铃薯立枯病的初侵染机率.