实时荧光定量PCR检测HULC lncRNA方法的建立及初步应用

• 作者: 梁勤东 汪先桃 涂植光 郭变琴
• 来源期刊: 激光杂志
• 学科: 医学
• 关键词: HULC lncRNA 实时荧光定量PCR 肝癌
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 激光医学与医学(论文与临床报告)
• 页码范围: 94-96
• 页数: 3页
• 分类号: TN244|R446.9|R34|R73-31
• 字数: 3593字
• 语种: 中文

摘要

目的:建立实时荧光定量PCR检测长链非编码RNA HULC的方法,探讨其在作为肝癌标志的应用价值.方法:根据Genebank中的HULC lncRNA(AY914050.1)全序列,设计HULC基因的特异引物,构建HULC基因的T克隆载体,命名为pMD18-T-HULC;以pMD18-T-HULC为实时荧光定量PCR检测HULC的标准品,建立实时荧光定量PCR检测HULC的方法并进行方法学评价.应用此方法检测8种肿瘤细胞株、肝癌组织、其它癌及癌旁组织中HULC lncRNA的表达.结果:HULC实时荧光定量PCR检测方法学的最低检测限为1.8× 103拷贝/L,线性范围为1.8× 103拷贝/L至4.6× 109拷贝/L;该法的批内变异系数(CV)＜2.0％,批间CV＜ 8.0％.其在肝癌组织和肝癌细胞株起始表达量为(7.6±3.1)×105拷贝/L至(5.6±3.2)×106拷贝/L,明显高于其它癌和癌旁组织HULC lncRNA表达量(＜1.8×103拷贝/L).新发现膀胱癌细胞株T24中表达量高[(6.7±2.4)×105拷贝/L],但在膀胱癌组织中表达低(＜1.8×103拷贝/L).结论:成功建立了实时荧光定量PCR检测HULC lncRNA的方法,HULC lcRNA可望作为肝癌的标志.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	汪先桃	重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室	7	36	4.0	6.0
2	涂植光	重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室	172	1533	19.0	32.0
3	梁勤东	重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室	4	6	2.0	2.0
4	郭变琴	重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室	4	20	3.0	4.0