实时荧光定量-聚合酶链反应方法检测肺炎支原体

• 作者: 何利华 孟凡亮 张建中 赵飞 顾一心
• 来源期刊: 疾病监测
• 学科: 医学
• 关键词: 肺炎支原体 Real-time PCR 临床检测
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 传染病监测
• 页码范围: 209-212
• 分类号: R375
• 语种: 中文

摘要

目的 建立一种快速、灵敏、特异的肺炎支原体实时荧光定量-聚合酶链反应(real-time PCR)检测方法,以期用于临床肺炎支原体感染检测.方法 通过测序分析和序列比对,选取肺炎支原体p1基因中保守区域设计特异性引物和荧光探针,建立和完善此real-time PCR检测方法,并进行扩增效率、灵敏度及特异度评价.与已报道的肺炎支原体常规聚合酶链反应(PCR)方法进行150份临床标本检测能力比较.结果 建立的real-time PCR方法对肺炎支原体的检测限约为10 cfu.使用该方法对9株肺炎支原体ATCC标准株和30株临床分离株核酸扩增均为阳性；对10种其他支原体、13种常见呼吸道病原菌染色体及人类染色体扩增结果均为阴性.同时,临床标本的检测结果显示该方法检测灵敏度优于常规PCR.结论 本研究建立的real-time PCR方法可快速、灵敏、特异地检测标本中肺炎支原体核酸,可适用于临床肺炎支原体诊断.