LMP-1基因慢病毒重组体对大鼠骨髓间充质干细胞的增殖影响及其表达

• 作者: 侯慧铭 卫小春 向川 梁长生 秦迎泽 魏增永
• 来源期刊: 中国骨伤
• 关键词: 基因组,病毒 骨髓细胞 细胞增殖 转染
• 年，卷（期）: 2013,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1023-1027
• 页数: 5页
• 字数: 3969字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-0034.2013.12.012

摘要

目的:探讨LMP-1重组慢病毒载体体外转染大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)的方法,并检测LMP-1基因对BMSC增殖能力的影响及表达.方法:选取清洁级4周龄SD大鼠6只(雌雄不限),无菌条件下提取骨髓间充质干细胞并培养至第3代,设立空白对照组(未经特殊处理,只有第3代骨髓间充质干细胞)、慢病毒载体转染组(在未经特殊处理的第3代骨髓间充质干细胞中加入PGC-FU-GFP及转染试剂Polybrene)和重组基因转染组(在未经特殊处理的第3代骨髓间充质干细胞中加入PGC-FU-LMP-1-GFP及转染试剂Polybrene)进行转染.转染48 h后,通过免疫荧光显微镜观察荧光表达,流式细胞仪检测慢病毒的转染效率,采用MTT法评价慢病毒转染对BMSC增殖的影响;Western Blot检测转染后基因的表达情况.结果:①成功培养出第3代SD大鼠BMSC,以100的感染复数(MOI)转染,48 h后免疫荧光显微镜下可见大量绿色荧光蛋白表达,转染效率达67％;②不同时间点慢病毒载体转染组和重组基因转染组,与空白对照组细胞增殖比较差异无统计学意义;③Western Blot检测示重组基因转染组72 kDa处有条特征带,其大小与LMP-1融合蛋白(～50kDa+28kDa=78kDa)基本吻合.结论:经LMP-1基因慢病毒重组体转染大鼠骨髓间充质干细胞对其增殖活力没有影响并可有效表达LMP-1.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	卫小春	山西医科大学第二医院骨科	256	1901	21.0	31.0
2	向川	山西医科大学第二医院骨科	60	354	9.0	16.0
3	侯慧铭	山西医科大学第二医院骨科	3	16	2.0	3.0
4	秦迎泽	山西医科大学第二医院骨科	6	122	3.0	6.0
5	魏增永	山西医科大学第二医院骨科	2	20	2.0	2.0
6	梁长生	山西医科大学第二医院骨科	1	7	1.0	1.0