免疫磁珠荧光量子点技术检测结核分枝杆菌

• 作者: 杨华 柏文娟 王洁 王祎龙 秦莲花 胡忠义 郭琪 陆俊梅 陈海珍 马慧 高诗会
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 免疫磁珠 荧光量子点 分枝杆菌 结核 检测 配体
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 466-471
• 页数: 6页
• 分类号: R378
• 字数: 3957字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/cjz.j.issn.1002-2694.2013.05.009

摘要

目的 筛选结核分枝杆菌(MTB)免疫磁珠荧光量子点检测方法的最佳配体组合.方法 将本室筛选获得的MTB结合肽H8和商业化抗MTB多克隆抗体(Pab)与纳米磁珠偶联,多肽H8、商业化抗MTB单克隆抗体(Mab)和抗热休克蛋白65单克隆抗体(Mabc)与荧光量子点偶联,分别获得2种免疫磁珠和三种功能化荧光量子点,两两组合用于MTB检测,通过显微镜下观察荧光信号以及激光诱导荧光仪测量荧光值,判断不同配体组合与MTB的亲和性及特异性,获得最佳组合及其检测下限.结果 偶联Mabc的荧光量子点与免疫磁珠MNP-Pab组合检测MTB结果为阴性,其余5组均为阳性.测量荧光值,检测效果较好的两组组合分别是MNP-Pab+QD-H8和MNP-H8+QD-H8,阳性荧光值与阴性对照组比值分别是4.394和3.956,检测下限均是102条菌/mL.6组组合与12种非结核分枝杆菌(NTM)的亲和性各异,而与3种非分枝杆菌均不结合.结论 MNP-Pab+QD-H8和MNP-H8+QD-H8 两组检测效果较好,与MTB亲和性较高,特异性较好,可作为MTB免疫磁珠荧光量子点检测技术的最佳配体组合.