三种定量方法在温泉水中军团菌连续性监测中的应用

• 作者: 任红宇 周海健 徐颖 李马超 王焕新 秦天 赵明强 邵祝军 闫革彬
• 来源期刊: 中华预防医学杂志
• 关键词: 军团菌,长滩 温泉 聚合酶链反应 荧光染料
• 年，卷（期）: 2013,（7）
• 所属期刊栏目: 检验技术
• 页码范围: 637-640
• 页数: 4页
• 字数: 3522字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0253-9624.2013.07.013

摘要

目的 比较传统的平板培养法、荧光定量PCR和荧光染料叠氮溴化乙锭(ethidium monoazide,EMA)结合荧光定量PCR的方法(EMA-荧光定量PCR)对温泉水中军团菌的检测效果.方法 于2011年每月(除5月份)对北京市某温泉度假村的5个温泉池进行采样,每月采集11份水样,全年共采集121份.分别采用传统的平板培养法、荧光定量PCR和EMA-荧光定量PCR方法对水样中军团菌进行定性和定量分析.结果 平板培养法、荧光定量PCR和EMA-荧光定量PCR检测温泉水中军团菌污染率分别为74.4％ (90/121)、100.0％(121/121)和100.0％(121/121)；3种方法对121份温泉水样本中军团菌定量数值分别为0.10 ～ 216.00菌落形成单位(CFU)/ml、1.47～1557.75基因单位(GU)/ml和0.20～301.69 GU/ml.荧光定量PCR、EMA-荧光定量PCR和平板培养方法对121份温泉水每份军团菌含量检测的中位数(第25百分位数～第75百分位数)分别为75.30 (32.51 ～ 192.10) GU/ml、36.46(16.08 ～91.21) GU/ml和5.30 (0.00 ～ 33.70) CFU/ml.对于121份温泉水水样,3种方法对军团菌含量分析的定量数值差异有统计学意义(x2=187.900,P＜0.01),其中荧光定量PCR的定量数值最高,EMA-荧光定量PCR的数值次之,平板培养的数值最低.结论 荧光定量PCR和EMA-荧光定量PCR方法检测温泉水中军团菌的灵敏度优于传统的培养方法,EMA-荧光定量PCR方法适合用于环境水体中军团菌活菌监测.