血清3型鸭甲型肝炎病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立与初步应用

• 作者: 孙庆歌 朱薇 温文生 漆世华 肖爱芳 舒银辉 薛霜 谢红玲 马慧慧
• 来源期刊: 中国兽药杂志
• 学科: 农学
• 关键词: 血清3型鸭甲型肝炎病毒 实时荧光定量RT-PCR
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 微生物与免疫
• 页码范围: 1-5
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.6
• 字数: 3909字
• 语种: 中文

摘要

通过对GenBank公布的鸭甲型肝炎病毒全序列比对,在3型鸭甲肝炎病毒(DHVA-3)5'非编码区的保守区,设计了一对检测引物和一条特异性TaqMan探针,以构建的阳性重组质粒经体外转录合成的RNA作为标准品绘制标准曲线,建立了一种快速检测DHAV-3的实时荧光定量RT-PCR方法.该方法能特异性地检测出DHAV-3,而与血清1型鸭肝炎病毒(DHAV-1)、鸭瘟病毒、新城疫病毒、禽流感病毒(H9)、呼肠孤病毒、传染性支气管炎病毒无交叉反应.在1.8×103～1.8×108 copies/μL的检测范围内标准曲线线性关系较好,R2为0.992.敏感性试验表明,最低检测限为36拷贝数RNA.用该方法和胚半数致死量法对尿囊液中病毒含量进行检测,表明二种方法检测结果呈正相关.本研究所建立的检测方法特异性好,灵敏度高,且操作方便,可为该病毒的快速诊断和流行病学调查提供技术手段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马慧慧		3	8	1.0	2.0
2	薛霜		6	42	4.0	6.0
3	朱薇		14	66	6.0	7.0
4	漆世华		29	109	6.0	8.0
5	温文生		12	38	4.0	5.0
6	舒银辉		7	24	4.0	4.0
7	孙庆歌		3	13	2.0	3.0
8	肖爱芳		3	13	2.0	3.0