基于酶-抗体共固定二氧化锆纳米信号探针的瘦肉精安培免疫传感器研究

• 作者: 干宁 曹玉廷 李天华 杜晓雯 林赛钗 桑卫国 詹盼
• 来源期刊: 分析化学
• 关键词: 竞争性酶联免疫分析 瘦肉精 酶-抗体共固定二氧化锆纳米探针 信号放大 安培免疫传感器
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 828-834
• 页数: 7页
• 字数: 5699字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1096.2013.21169

摘要

制备了基于酶-抗体共固定二氧化锆(ZrO2)纳米探针进行信号放大的盐酸特伦克罗瘦肉精(CLB)检测安培免疫传感器.首先,利用ZrO2纳米粒子负载葡萄糖氧化酶(Glucose oxidase,GOD)和CLB抗体(Clenbuterol antibody,anti-CLB),制得纳米探针(ZNPs/GOD-anti-CLB signal probe,简称ZNPG).同时将聚二烯丙基二甲基氯化铵[Poly(diallyldimethylammonium chloride),PDDA]、氯化血红素(Hemin)和纳米金(AuNPs)层层组装到多壁碳纳米管(MWCNTs)修饰的丝网印刷电极(SPCE)表面,制得SPCE ｜ MWCNTs/ (PDDA/Hemin/AuNPs)n电流型传感器,可对H2O2产生还原催化电流.检测CLB时,将样品和ZNPG一起加入预先包埋好CLB的96孔板底部.样品CLB与板底CLB共同竞争结合孔溶液中的纳米探针ZNPG.反应结束后加入葡萄糖,板底ZNPG-CLB免疫复合物上的GOD催化葡萄糖氧化产生H2O2,可通过传感器检测.电流下降值(△I)与样品CLB成反比,可用于CLB的定量分析.由于ZNPG上具有高的GOD酶标记密度,故可以显著放大检测信号,提高检测灵敏度.在最佳条件下(pH 7.0,温育时间30 min,温育温度37℃),此传感器对CLB的检测范围为0.003 ～ 100 μg/L,检测下限为1 ng/L,比酶联免疫分析法(ELISA)法灵敏度提高2个数量级,在猪饲料样品中进行加标回收实验,平均回收率达93.6％,相对标准偏差(RSD)小于2.5％,精密度好.同时该传感器具有可重复使用、灵敏快速,适合于食物样品中痕量CLB现场检测.