放射线照射诱导鼻咽癌细胞上皮-间质转化的作用研究

• 作者: 任舒灵 刘勇 刘超 李果 田勇泉 粟忠武 邱元正
• 来源期刊: 中华耳鼻咽喉头颈外科杂志
• 关键词: 鼻咽肿瘤 上皮间质转化 放射疗法 辐射耐受性
• 年，卷（期）: 2013,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 662-667
• 页数: 6页
• 字数: 4860字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-0860.2013.08.011

摘要

目的 体外实验探讨放射线照射对鼻咽癌细胞上皮-间质转化的影响.方法 采用梯度递增放射线照射筛选构建鼻咽癌CNE-2放疗抵抗细胞(CNE-2 with radio resistance,CNE-2-Rs),并通过CCK-8法、克隆形成实验、流式细胞术验证CNE-2-Rs细胞的放疗抵抗性.显微镜下观察照射过程中,CNE-2细胞的形态学改变；Western blot检测不同照射时期CNE-2细胞上皮细胞标志物钙黏蛋白和间质细胞标志物波形蛋白的表达情况.结果 CCK-8结果表明,CNE-2-Rs细胞在同一时间点(第4天)不同照射剂量(4、6、8 Gy)以及同一照射剂量(4 Gy)不同时间点(2～5 d)下的存活率均高于其亲本细胞(P值均＜0.05)；4 Gy放射线照射前细胞增殖能力基本一致,放射线照射后CNE-2增殖能力明显低于CNE-2-Rs；CNE-2-Rs细胞放射线处理后,集落形成能力强于亲本细胞(P值均＜0.05)；拟合多靶单击模型和线性二次模型细胞存活曲线,结果表明,平均致死剂量(mean lethal dose,D0)、准阈剂量(quasi-threshold dose,Dq)、2 Gy细胞存活分数(survival fraction,SF2)和平均灭活剂量(mean inactivation dose,MID)增加,α和α/β值减少(P值均＜0.05)；CNE-2-Rs细胞接受4Gy射线后,相对于CNE-2细胞出现S期、G2期细胞比例增多(P值均＜0.05).CNE-2-Rs细胞在形态上出现呈梭形、伪足伸出和细胞间连接变松散等上皮-间质转化形态学改变.照射总剂量达24 Gy后,CNE-2细胞钙黏蛋白表达下调和波形蛋白表达升高(P值均＜0.01).结论 鼻咽癌细胞在放射线照射过程中出现典型的上皮-间质转化形态学及分子标志物改变,提示上皮-间质转化可能在鼻咽癌放疗抵抗中发挥了重要作用.