传染性胰腺坏死病毒VP2 COE蛋白单克隆抗体的制备与初步应用

• 作者: 刘敏 唐立杰 张琳琳 李一经 葛俊伟 贾鹏 赵丽丽 连科迅
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 传染性胰腺坏死病毒 VP2重组蛋白 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2013,（8）
• 页码范围: 1229-1235
• 分类号: Q785|S941.41
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1231.2013.38420

摘要

为制备抗IPNV VP2蛋白的单克隆抗体,对其基本特性进行鉴定并进行初步应用.实验利用Ni-NTA亲和层析纯化的IPNV VP2 COE重组蛋白作为免疫原,免疫8周龄的雌性BALB/c小鼠,经3次免疫后,将免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤SP2/0细胞融合.采用间接ELISA和有限稀释法筛选杂交瘤细胞,共得到2株能稳定分泌特异性抗体的阳性细胞株,分别命名为5G10和5F3,亚类鉴定均为IgG1亚类.2株杂交瘤细胞的染色体数目在75 ～ 120之间.间接ELISA检测5G10和5F3细胞培养上清的效价分别为1∶105、1∶102,腹水效价分别为1∶108、1∶104.Western-blotting和间接免疫荧光鉴定结果显示,2株单抗均能特异性地识别IPNV.间接ELISA表明,2株单抗不与IHNV、VHSV、SVCV、HRV等病毒反应,说明获得的单抗具有高度的特异性.相加ELISA实验结果显示,2株单克隆抗体分别识别IPNV VP2蛋白上不同的抗原位点.应用间接免疫荧光方法对临床确定为患有IPN虹鳟肝组织进行检测,结果证实该2株单克隆抗体可用于后续实验.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李一经	东北农业大学动物医学学院	219	1679	20.0	27.0
2	葛俊伟	东北农业大学动物医学学院	74	425	11.0	17.0
3	赵丽丽	东北农业大学动物医学学院	18	191	7.0	13.0
4	唐立杰	东北农业大学动物医学学院	2	14	2.0	2.0
5	贾鹏		6	33	3.0	5.0
6	连科迅	东北农业大学动物医学学院	2	18	2.0	2.0
7	张琳琳	东北农业大学动物科学与技术学院	2	13	1.0	2.0