转GsPPCK1基因苜蓿植株的获得及其耐碱性分析

• 作者: 化烨 才华* 朱延明 柏锡 王臻昱 益东 纪巍 魏正巍
• 来源期刊: 作物学报
• 关键词: 苜蓿 GsPPCK1 转基因株系 耐碱性分析
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 页码范围: 68-75
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1006.2013.00068

摘要

磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶激酶(phosphoenolpyruvate carboxylase kinase, PPCK)是一种钙不依赖的丝氨酸/苏氨酸(Ser/Thr)类蛋白激酶,参与碳氮代谢等多个生物学过程,然而其在碱胁迫反应中的作用尚未见报道.本研究在前期野生大豆碱胁迫基因表达谱数据基础上,采用同源克隆的方法分离野生大豆(Glycine soja) PPCK1基因,该基因编码的氨基酸序列与大豆(Glycine max) PPCK1蛋白(AAQ83695.1)具有99%的相似性,被命名为GsPPCK1.在50 mmol L–1 NaHCO3胁迫处理3 h内,根和叶中GsPPCK1基因上调表达,属碱胁迫早期应答基因.通过农杆菌介导法对肇东苜蓿进行遗传转化,并对RT-PCR阳性的超表达转基因株系进行耐碱性分析,在100 mmol L–1 NaHCO3处理15 d后转基因株系生长状态良好,而非转基因对照株系明显萎蔫、失绿、甚至死亡;转基因株系的丙二醛含量和相对质膜透性显著低于非转基因株系(P<0.05),而叶绿素含量和根系活力显著高于非转基因对照(P<0.05),说明超量表达GsPPCK1基因增强了苜蓿的耐碱能力.以上结果表明, GsPPCK1参于植物耐碱胁迫反应过程,在碱胁迫基因工程研究领域具有良好的理论和实际应用意义.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	柏锡	东北农业大学生命科学学院	80	891	15.0	26.0
2	纪巍	东北农业大学生命科学学院	44	518	13.0	21.0
3	朱延明	东北农业大学生命科学学院	125	1696	22.0	34.0
4	魏正巍	东北农业大学生命科学学院	3	24	2.0	3.0
5	化烨	东北农业大学生命科学学院	2	62	2.0	2.0
6	才华*	东北农业大学生命科学学院	1	14	1.0	1.0
7	王臻昱	东北农业大学生命科学学院	5	31	3.0	5.0