利迪链霉菌A02细菌人工染色体基因组文库的构建

• 作者: 刘伟成 吴慧玲 张涛涛 董丹
• 来源期刊: 科技导报
• 学科: 生物学
• 关键词: 利迪链霉菌 BAC文库 脉冲场凝胶电泳
• 年，卷（期）: 2013,（25）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 53-57
• 页数: 5页
• 分类号: Q785
• 字数: 5240字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3981/j.issn.1000-7857.2013.25.008

摘要

利迪链霉菌A02是从京郊森林土壤中分离筛选出的植物真菌病害高效生防菌,其活性产物为安全高效广谱的抗真菌剂纳他霉素.为了克隆纳他霉素生物合成基因簇和调控其表达相关的功能基因,通过基因改良的方式进行A02的定向分子改造,提高纳他霉素的效价和产量,提取了利迪链霉菌A02的基因组DNA,用Hind川和BamHI部分酶解后,回收了97～194kb和48.5～97kb大小的高分子量DNA,与质粒载体Copycontrol pCC1BAC连接,分别构建了含有800个和1500个克隆的两个BAC文库.从文库中随机挑选20个克隆,酶切检测平均插入片段分别为133kb和65kb,空载率小于1％,假定利迪链霉菌的基因组有8× 106kb,计算文库基因组覆盖率分别为12.28倍和11.25倍.因此,从文库筛选到目标片段的概率达99.99％以上.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘伟成	北京市农林科学院植物保护环境保护研究所	78	836	16.0	25.0
2	张涛涛	北京市农林科学院植物保护环境保护研究所	26	197	8.0	13.0
3	董丹	北京市农林科学院植物保护环境保护研究所	15	55	5.0	7.0
4	吴慧玲	北京市农林科学院植物保护环境保护研究所	15	43	5.0	6.0