血清-巨噬细胞间胆固醇净流动测定研究

• 作者: 国汉邦 李红霞 杨睿悦 王抒 王默 董军 赵海建 陈文祥
• 来源期刊: 中华检验医学杂志
• 关键词: 巨噬细胞 胆固醇 色谱法,高压液相 动脉粥样硬化
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 151-155
• 页数: 5页
• 字数: 4477字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2013.02.013

摘要

目的 建立一种高效液相色谱(HPLC)测定血清-巨噬细胞间胆固醇净流动的方法,用以分析与动脉粥样硬化危险因素的关系.方法 培养小鼠巨噬细胞J774,用含5％个体血清的培养基进行孵育8h,HPLC测定孵育前后细胞胆固醇,计算个体血清介导的细胞胆固醇净流动,建立血清-巨噬细胞间胆固醇净流动的测定方法.2010年10至12月征集75名北京医院健康志愿者,男38例、女37例,采集空腹静脉血,用所建方法测定胆固醇净流动；Spearman相关分析胆固醇净流动与血脂、脂蛋白、超敏C反应蛋白(hsCRP)等动脉粥样硬化危险因素的关系.结果 发现个体血清孵育细胞时导致细胞胆固醇内流,细胞胆固醇随培养基中血清浓度和孵育时间的增加而增多.HPLC测定细胞胆固醇净流动的平均批内变异和总变异分别为0.81％ ～4.03％和4.25％ ～6.58％.75例健康志愿者胆固醇净流动均值为10.27 μg/mg蛋白,标准差2.69 μg/ mg蛋白,中位数10.12 μg/mg蛋白.胆固醇净流动与血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、hsCRP,载脂蛋白(Apo)CⅡ、ApoCⅢ、小而密低密度脂蛋白胆固醇(LDLb-C)、高密度脂蛋白(HDL)胆固醇摩尔酯化速率(MERHDL) (P ＜0.001),HDL胆固醇分数酯化速率FERHDL、Preβ-HDL(P＜0.01)等呈显著正相关,但与HDL及其亚类胆固醇无相关性(P＞0.05).结论 本研究建立了血清-巨噬细胞间胆固醇净流动的细胞分析体系和HPLC准确测定净流动的方法,为进一步研究血清-巨噬细胞间胆固醇净流动、HDL功能评价和心血管病危险分析提供了方法学基础.