子宫内膜癌细胞中干细胞样细胞对醋酸甲羟孕酮的抵抗作用及其机制

• 作者: 刘冰洁 李小平 王建六 赵丽君 魏丽惠
• 来源期刊: 中华妇产科杂志
• 关键词: 子宫内膜肿瘤 甲羟孕酮17-乙酸酯 抗药性,肿瘤 肿瘤干细胞
• 年，卷（期）: 2013,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 772-777
• 页数: 6页
• 字数: 6330字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0529-567x.2013.10.012

摘要

目的 初步探讨子宫内膜癌细胞中干细胞样(SP)细胞对醋酸甲羟孕酮(MPA)的抵抗作用及其机制.方法 (1)采用流式细胞仪Hoechst33342(是一种荧光染色液)染色法分选子宫内膜癌细胞系Ishikawa细胞中的SP细胞(即Ishikawa-SP细胞)和非SP细胞(即Ishikawa-non-SP细胞),采用平板克隆形成实验、免疫组化法分别检测Ishikawa-SP和Ishikawa-non-SP细胞的集落形成率及乳腺癌耐药蛋白(BCRP)的表达.(2)不同浓度(分别为5、10、15、20 μmol/L)的MPA处理Ishikawa-SP、Ishikawa-non-SP、Ishikawa细胞不同时间(分别为24、48、72 h)后,采用甲烷硫代磺酸盐(MTS)法检测3种细胞生长的抑制率,选择Ishikawa细胞生长的抑制率最接近50％时MPA的处理浓度和时间(即为10 μmol/L的MPA处理72 h时)用于以下实验.(3)以10 μmol/L的MPA处理Ishikawa-SP、Ishikawa-non-SP、Ishikawa细胞72 h后,采用流式细胞仪检测3种细胞的凋亡率,采用免疫组化法检测3种细胞中凋亡蛋白——半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)的表达.结果 (1)子宫内膜癌细胞系Ishikawa细胞中存在少量SP细胞,其比例为2.7％；Ishikawa-SP和Ishikawa-non-SP细胞的集落形成率分别为(6.02±1.17)％、(0.53±0.20)％,两者比较,差异有统计学意义(P=0.001)；Ishikawa-SP和Ishikawa-non-SP细胞中BCRP蛋白表达的综合得分分别为(16.3±2.0)、(13.4±1.5)分,两者比较,差异有统计学意义(P =0.001).(2)Ishikawa-SP、Ishikawa-non-SP及Ishikawa细胞生长的抑制率,随着MPA浓度的增加和处理时间的延长均增加,呈明显的浓度和时间依赖性(P＜0.05).其中,MPA对Ishikawa-SP细胞的抑制作用最弱.(3)以10 μmol/L的MPA处理72 h后,Ishikawa-SP、Ishikawa-non-SP、Ishikawa细胞的凋亡率分别为(4.01±0.43)％、(9.30±0.67)％、(4.64±0.18)％,3者间比较,差异有统计学意义(P＜0.05)；3种细胞中caspase-3蛋白表达的综合得分分别为(14.9±1.1)、(16.1±1.0)、(15.5±1.2)分,3者间比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 MPA对Ishikawa、Ishikawa-SP、Ishikawa-non-SP细胞的生长均有抑制作用,但Ishikawa-SP细胞的生长抑制率及凋亡率均明显低于Ishikawa和Ishikawa-non-SP细胞,显示Ishikawa-SP细胞具有孕激素抵抗的特性,其抵抗机制可能与肿瘤干细胞的耐药性和细胞凋亡有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李小平	北京大学人民医院妇科	158	792	12.0	21.0
2	王建六	北京大学人民医院妇科	596	4427	29.0	45.0
3	魏丽惠	北京大学人民医院妇科	508	4482	30.0	44.0
4	赵丽君	北京大学人民医院妇科	48	201	7.0	12.0
5	刘冰洁	北京大学人民医院妇科	5	10	2.0	3.0