拟南芥RPS14基因的克隆表达及功能初步研究

• 作者: 刘莹 张飞云 范艳荣
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 拟南芥 RPS14 AK6 Pull-down
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 73-77
• 语种: 中文

摘要

拟南芥RPS14(Ribosomal protein S14)是从拟南芥中分离出的一种核糖体蛋白,是核糖体40S亚基的组成成分,属于S11P核糖体蛋白家族,主要负责RNA转录后加工.提取拟南芥总RNA,用RT-PCR技术得到RPS14全长基因,经T-A克隆插入到pEASY-T3载体上.利用亚克隆法成功构建pGEX-6P-1-RPS14原核表达质粒.GST-RPS14融合蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,分子量约为43 kD.运用同样方法构建pET-28a-AK6原核表达质粒,获得大小约为26 kD的HIS-AK6融合蛋白.运用体外pull-down技术,并用SDS-PAGE和Western blot进行验证,证明拟南芥RPS14蛋白与AK6蛋白之间存在相互作用.因此,推测拟南芥的AK6与RPS14蛋白共同参与核酸代谢过程,影响RNA转录后加工,进而抑制拟南芥茎细胞的生长,使植株表现矮小特征.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘莹	首都师范大学生命科学学院	17	32	3.0	5.0
2	张飞云	首都师范大学生命科学学院	23	111	6.0	9.0
3	范艳荣	首都师范大学生命科学学院	1	4	1.0	1.0