Zyxin基因真核表达载体的构建及检测

• 作者: 孙大辉 孙明明 张佳琦 张敏宇 张跟喜 戴国俊 施会强 林雨鑫 谢恺舟
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 生物学
• 关键词: Zyxin基因 真核载体 表达
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 畜牧兽医·水产养殖
• 页码范围: 822-825
• 页数: 4页
• 分类号: Q782
• 字数: 2372字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2013.04.023

摘要

为了研究联蛋白基因(Zyxin)功能,对Zyxin基因进行了真核表达载体的构建,并对其进行鉴定.用全基因合成的方法得到Zyxin目的基因,将目的基因与pEX-6载体分别进行酶切,然后进行连接,连接产物转化到感受态大肠杆菌.挑取克隆,经质粒DNA抽提和酶切,琼脂糖凝胶电泳和测序,对克隆片段进行鉴定.将重组质粒pEX-6-Zyxin瞬时转染293T细胞.结果显示:电泳、双酶切和测序结果与预期结果相符.转染48 h后观察到红色荧光,用实时荧光定量PCR检测转染后48 h和72 h Zyxin基因mRNA水平有较高表达.表明成功构建了鸡Zyxin真核表达载体,为进一步研究该基因功能奠定了基础.