BMP4诱导鸡胚胎干细胞向雄性生殖细胞分化的研究

• 作者: 张亚妮 张振韬 施青青 李碧春 李鹏程 王丹 郑蒙蒙 黄晓梅
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡胚胎干细胞 雄性生殖细胞 分化 BMP4
• 年，卷（期）: 2013,（11）
• 所属期刊栏目: 遗传繁育
• 页码范围: 1749-1757
• 页数: 9页
• 分类号: S831.2|Q254
• 字数: 6319字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2013.11.008

摘要

旨在探讨BMP4诱导鸡胚胎干细胞向雄性生殖细胞分化的作用机理.采用单层贴壁培养作为分化模式,分别采用10、20、30和40 ng·mL-1 BMP4浓度诱导雄性鸡胚胎干细胞,通过形态学、荧光定量PCR和免疫细胞化学检测诱导效果.根据细胞形态变化和差异基因表达量变化,确定了BMP4的适宜诱导浓度为40 ng·mL-1.在适宜浓度诱导过程中,诱导4d类胚体开始出现,6～8 d类胚体逐渐增大,数量增多,10 d部分类胚体开始散开,变为小的圆形细胞,12 d在散开后的类胚体周围可观察到少量生殖样细胞,14 d生殖样细胞数目增多,且呈聚团生长的趋势.诱导过程中相应基因表达量也发生变化:胚胎干细胞标记基因Nanog、Sox2表达量显著下降(P＜0.01),生殖细胞特异基因Stra8、Dazl、integrin α6、c-kit表达量均呈显著上升趋势(P＜0.01).BMP4可以引起生殖细胞相应基因的表达,促进雄性鸡胚胎于细胞向雄性生殖细胞方向分化,结果为雄性生殖细胞的体外诱导研究提供试验参考,为进一步研究雄性生殖细胞发生和调控机制提供理论基础.