粘帚霉GR-6菌株种类鉴定及其β-1,3-葡聚糖酶纯化与酶学性质

• 作者: 张清霞 徐敬友 杨荣华 童蕴慧 纪兆林 陈夕军
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 粉红粘帚霉 β-1,3-葡聚糖酶 分离纯化
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 植物保护
• 页码范围: 755-759
• 页数: 5页
• 分类号: S476
• 字数: 3320字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2013.04.011

摘要

为明确粘帚霉GR-6产生的β-1,3-葡聚糖酶对植物病原真菌的作用机制,建立β-1,3-葡聚糖酶分离纯化体系,根据形态特征和ITS序列分析鉴定GR-6种类,用60％饱和度的丙酮沉淀酶蛋白质,再通过DE-52离子交换层析和Sephadex G-75凝胶柱层析纯化蛋白质.结果表明,GR-6菌株ITS序列与粉红粘帚霉的相似度最高,达到98％,结合形态学特征将该菌株鉴定为粉红粘帚霉.SDS-PAGE显示纯化后得到一种分子量为4.11×104的蛋白质,该蛋白质具有β-1,3-葡聚糖酶活性.经该酶处理后的水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solani)和棉花黄萎病菌(Verticilliun dahliae)菌丝颜色变浅、细胞轮廓变模糊、甚至菌丝细胞逐渐消失,可见,粉红粘帚霉GR-6产生的β-1,3-葡聚糖酶对这两种植物病原真菌菌丝有直接破坏作用.纯化后的β-1,3-葡聚糖酶的最适反应温度为50℃,最适反应pH值为4,酶液在50℃以下或pH 5时保存0.5h,酶活性基本保持稳定;该葡聚糖酶对一些金属离子较敏感,其中Zn2+、Sn2+、Ca2+、Fe2+等使酶活性显著降低,而Mn2+和K+对酶活性没有明显的影响.建立的β-1,3-葡聚糖酶纯化体系稳定可靠.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张清霞	扬州大学园艺与植物保护学院	24	222	7.0	14.0
2	童蕴慧	扬州大学园艺与植物保护学院	82	1786	23.0	41.0
3	纪兆林	扬州大学园艺与植物保护学院	74	1451	20.0	37.0
4	徐敬友	扬州大学园艺与植物保护学院	80	1869	25.0	42.0
5	陈夕军	扬州大学园艺与植物保护学院	78	1689	22.0	40.0
6	杨荣华	扬州大学园艺与植物保护学院	1	1	1.0	1.0