利用改良后的脾内免疫和半固体培养基法制备单克隆抗体

• 作者: 任瑞敏 张怡青 李恒思 李玉林 王云龙 王国强 王继创
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 脾内免疫 软琼脂培养法 甲基纤维素法
• 年，卷（期）: 2013,（8）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 166-169
• 语种: 中文

摘要

旨在利用改良后的脾内免疫和半固体培养基法制备单克隆抗体,节约免疫原用量、简化试验操作、一步法筛选和克隆杂交瘤细胞、缩短单抗制备周期.通过局部麻醉小鼠脾脏区域皮肤,切开后透过腹膜直接向脾脏内注射微量抗原,使小鼠的脾细胞在短时间内产生免疫反应,尾静脉注射强化免疫后进行细胞融合;选取半固体培养基(甲基纤维素、软琼脂)法,以有限稀释法作对照筛选分泌高效价抗体的杂交瘤细胞.结果显示,与传统的单抗制备方法相比,改进后的脾内免疫操作更简单,联合尾静脉注射,使用微量免疫原在短时间内产生高效价抗体;半固体培养基甲基纤维素浓度在1.1％条件下,获得克隆团较多,阳性率较高.本研究方法适用于大规模制备单克隆抗体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李玉林		35	123	7.0	9.0
2	王云龙	郑州大学生物工程系	14	88	6.0	9.0
4	李恒思		9	34	3.0	5.0
5	王国强		10	46	3.0	6.0
8	王继创		16	50	3.0	6.0
9	张怡青	河南师范大学生命科学学院	5	18	2.0	4.0
10	任瑞敏	郑州大学生物工程系	2	23	2.0	2.0