鱼腥草查耳酮合成酶1基因cDNA克隆、差异表达及其蛋白质序列分析

• 作者: 伍贤进 刘胜贵 吴成就 唐玉莲 徐杰 贺安娜 魏麟
• 来源期刊: 中草药
• 学科: 医学
• 关键词: 鱼腥草 查耳酮合成酶 基因克隆 序列分析 荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2013,（23）
• 所属期刊栏目: 药材与资源
• 页码范围: 3372-3378
• 分类号: R282.12
• 语种: 中文
• DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2013.23.021

摘要

目的 克隆鱼腥草查耳酮合成酶1 (CHSl)基因并分析其蛋白质序列.方法 根据已经克隆的植物CHS基因的保守序列设计一对引物,以鱼腥草总RNA为模板,采用RT-PCR和SON-PCR的方法快速获得CHS基因序列并连接到pMD 18-TSimple载体上,阳性克隆经PCR检测后进行测序.结果 得到一段1 188bp的序列,序列分析表明,该片段编码395个氨基酸,与其他高等植物CHS基因氨基酸序列同源性在62.3％以上,生物信息学分析表明,该蛋白含有CHS家族的特征多肽序列“RLMMYQQGCFAGGTVLR”和“GVLFGFGPGL”,不含信号肽序列.相对荧光定量PCR分析表明,CHS1基因在花中的表达量最高,其次是地上茎,再次是地下茎,叶片中表达量最低.结论 首次从鱼腥草中克隆了CHS1基因,为有效利用该基因奠定了基础.