乳腺癌细胞中MRJ稳定干扰导致MMP-9表达增强和细胞骨架重排

• 作者: 华子春 庄红芹 彭娜娜 王耀
• 来源期刊: 中国细胞生物学学报
• 关键词: 乳腺癌 MRJ 细胞骨架 基质金属蛋白酶
• 年，卷（期）: 2013,（9）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1334-1341
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.11844/cjcb.2013.09.0135

摘要

应用构建稳定乳腺癌细胞系的方法研究MRJ干扰后上调乳腺癌细胞中基质金属蛋白酶MMP-9的表达,并影响细胞骨架的重排.为了探讨MRJ(S)与MMP-9和细胞骨架的关系,将MDA-MB-231细胞转染干扰质粒pRNAT-U6.1/neo-MRJsi,用G418(Zeocin)(600 μg/mL)筛选得到MRJ(S)稳定干扰的细胞系,命名为MDA-MB-231/MRJsi.利用Q-PCR和Western blot检测MDA-MB-231/MRJsi细胞和野生型细胞之间MRJ mRNA水平和蛋白水平的差异.利用鬼笔环肽染色和anti-α-tublin的免疫荧光分析观察MDA-MB-231/MRJsi细胞系中微丝和微管的变化.同时,利用明胶酶谱法检测MDA-MB-231和MDA-MB-231/MRJsi细胞系中基质金属蛋白酶MMP-9的酶活性变化并进一步利用Q-PCR检测MRJ干扰后细胞内MMP-9的mRNA水平差异.结果表明,成功构建MRJ稳定干扰的MDA-MB-231/MRJsi稳定细胞系,与野生型MDA-MB-231细胞比较,MDA-MB-231/MRJsi细胞系中MRJ mRNA水平下降了50％(P＜0.05),MRJ(S)蛋白表达水平下调70％;细胞骨架微丝和微管发生重排;MMP-9酶活性增强;MMP-9的mRNA水平显著上升(P＜0.01),与其酶活性水平变化一致.该文MDA-MB-231/MRJsi稳定细胞系提供了一个研究MRJ(S)与乳腺癌发生发展的细胞模型;MRJ(S)可以影响MDA-MB-231细胞中MMP-9的表达并引发细胞骨架重排.