过氧化氢对金属硫蛋白Ⅰ/Ⅱ敲除小鼠脾细胞的氧化应激***★

• 作者: 刘凤勇 叶静 和静 姚小梅 沈炳玲 韦思宇
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 组织构建 组织构建细胞学实验 金属硫蛋白 金属硫蛋白Ⅰ/Ⅱ基因敲除小鼠 脾 凋亡 N-乙酰-L-半胱氨酸 过氧化氢 氧化应激 线粒体通透性转换孔 脑缺血再灌注 乳酸脱氢酶 国家自然科学基金
• 年，卷（期）: 2013,（7）
• 页码范围: 1243-1250
• 分类号: R318
• 字数: 9164字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2013.07.019

摘要

背景:脑缺血再灌注早期,由于脾脏中有大量炎症因子浸润引发氧化应激损伤,导致脑缺血再灌注后脾细胞出现大量凋亡.目的:观察外源性过氧化氢对金属硫蛋白Ⅰ/Ⅱ敲除小鼠脾细胞活力的影响及 N-乙酰-L-半胱氨酸对过氧化氢诱导的脾细胞氧化应激损伤的保护作用.方法:制备金属硫蛋白Ⅰ/Ⅱ敲除小鼠脾细胞悬液,分别用不同浓度(0.1,0.2,0.5,1,2 mmol/L)过氧化氢处理2 h 后,MTT 比色法检测细胞活力.根据 MTT 结果选择不同浓度过氧化氢(0.5,1 mmol/L)诱导脾细胞凋亡,实验分为6组:对照组、N-乙酰-L-半胱氨酸组、0.5 mmol/L 过氧化氢组、1 mmol/L过氧化氢组、N-乙酰-L-半胱氨酸+0.5 mmol/L 过氧化氢组、N-乙酰-L-半胱氨酸+1 mmol/L 过氧化氢组,2 h 后 MTT 比色法检测细胞活力,酶标仪法检测乳酸脱氢酶活力及紫外分光光度仪检测线粒体通透性转换孔的开放情况.结果与结论:随过氧化氢浓度增加脾细胞活力呈明显下降趋势(P <0.01),且0.2,0.5,1,2 mmol/L 过氧化氢组脾细胞活力下降幅度最大.与对照组相比,N-乙酰-L-半胱氨酸组脾细胞活力明显提高(P <0.01),且乳酸脱氢酶活力降低(P <0.01),线粒体通透性转换孔开放减少(P <0.01);分别于0.5,1 mmol/L过氧化氢组相比,N-乙酰-L-半胱氨酸+0.5 mmol/L 过氧化氢组、N-乙酰-L-半胱氨酸+1 mmol/L 过氧化氢组脾细胞活力也明显提高(P <0.01),乳酸脱氢酶活力降低(P <0.01),线粒体通透性转换孔开放减少(P <0.01).结果表明,金属硫蛋白Ⅰ/Ⅱ敲除小鼠随着过氧化氢浓度的升高,脾细胞活力逐渐下降,呈浓度依赖性,尤其对0.2,0.5,1,2 mmol/L 过氧化氢刺激最为敏感.N-乙酰-L-半胱氨酸使乳酸脱氢酶释放和线粒体通透性转换孔的开放减少,脾细胞活力增强,以此减轻过氧化氢诱导的金属硫蛋白Ⅰ/Ⅱ敲除鼠脾细胞的氧化应激损伤.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沈炳玲	天津医科大学基础医学院病理生理教研室	21	100	6.0	9.0
2	刘凤勇	天津医科大学基础医学院病理生理教研室	18	82	5.0	8.0
3	姚小梅	天津医科大学基础医学院病理生理教研室	38	274	10.0	15.0
4	叶静	天津医科大学基础医学院病理生理教研室	24	137	5.0	11.0
5	和静	天津医科大学基础医学院病理生理教研室	2	7	2.0	2.0
6	韦思宇	天津医科大学基础医学院病理生理教研室	2	7	2.0	2.0