兔神经源性尿路障碍输尿管功能变化及BKca表达研究

• 作者: 任川川 夏明亮 文建国 李真珍 杨黎 王庆伟 苏志强 郭战
• 来源期刊: 中华小儿外科杂志
• 关键词: 大电导钙激活钾通道 尿动力学 输尿管 动物实验
• 年，卷（期）: 2013,（9）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 684-689
• 页数: 6页
• 字数: 4599字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0253-3006.2013.09.011

摘要

目的 探讨兔神经源性尿路障碍(neurogenic urinary tract dysfunction,NUTD)输尿管功能改变及大电导钙激活钾通道(large-conductance Ca2+-activated K+ channels,BKca)的表达变化.方法 将30只日本大耳白兔,体重2.0～2.5 kg,编号后查随机数字表随机均分为NUTD组、实验对照组和空白对照组;其中NUTD组给予破坏L6以下脊髓,2周后行脊柱MRI和影像尿动力学检查证实存在明确神经损害,膀胱表现为逼尿肌无收缩但无膀胱输尿管反流;实验对照组仅咬除棘突,未破坏脊髓,2周后行脊柱MRI和尿动力学检查证实不存在明确神经损害,无明显膀胱尿道功能障碍.模型建立后2个月,3组家兔均进行影像尿动力学测定、输尿管功能和形态学观察,并应用免疫组织化学法、荧光定量PCR和Western-blot检测其输尿管平滑肌细胞(USMC) BKca mRNA和蛋白表达情况.结果 发现动物模型建立后2个月NUTD组表现为逼尿肌无收缩,无膀胱输尿管反流发生;在1 ml·kg-1·min-1恒定速度静脉滴注生理盐水条件下,NUTD组30 min内产生尿量为(18.5±3.7)ml,实验对照组为(19.5±2.4)ml,空白对照组为(17.8±3.2)ml,三组间差异无统计学意义.左侧输尿管蠕动次数NUTD组为(39.0±3.0)显著低于实验对照组(44.0±5.0)和空白对照组(46.0±4.0),差异有统计学意义(P＜0.05);光镜下NUTD组输尿管各层无明显变化;NUTD组USMC中BKcaα mRNA(2.89±0.67)和BKcaβ mRNA(4.59±1.22)表达相对于空白对照组mRNA (BKcaα:1.02±0.21;BKcaβ:1.03±0.28)平均分别上调2.89和4.59倍,差异有统计学意义(P＜0.001);NUTD组BKcaα(1.35±0.32)和BKcaβ(1.47±0.10)蛋白表达相对于空白对照组(BKcaα:0.89±0.10;BKcaβ:1.03±0.13)显著上调,差异有统计学意义(P＜0.001).结论 NUTD早期在未发生膀胱输尿管反流和输尿管光镜病理改变时即已发生输尿管功能障碍,输尿管平滑肌细胞BKca表达水平升高抑制输尿管USMC兴奋性和收缩性可能是其输尿管功能障碍的原因之一.