空肠弯曲菌环介导等温扩增检测方法的建立和优化

• 作者: 史爱华 周宏专 徐福洲 杨兵 苏霞 许紫建
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 农学
• 关键词: 空肠弯曲菌 环介导等温扩增方法 检测 优化
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 页码范围: 222-226
• 页数: 5页
• 分类号: S855.1
• 字数: 4934字
• 语种: 中文

摘要

首先根据空肠弯曲菌 mapA 基因序列设计 LAMP 引物，建立检测空肠弯曲菌的 LAMP 检测方法。继而对LAMP 方法中不同反应组分的浓度分别进行筛选，结果显示，当内外引物浓度分别为1．6，0．2μmol/L、Mg 2＋浓度为8 mmol/L、dNTP 浓度为1．4 mmol/L、Betaine 浓度为0．8 mol/L 时获得最佳的反应结果。最后对 LAMP 反应的特异性和敏感性进行检测，特异性检测结果显示，对其他13种革兰氏阴性和革兰氏阳性细菌扩增结果均为阴性；敏感性检测结果显示，对空肠弯曲菌基因组 DNA 的检测限为每个反应管100 fg，对空肠弯曲菌培养菌液检测限为每个反应管7．5 cfu。试验建立的 LAMP 方法为快速简便地自动物源性产品中检测空肠弯曲菌奠定了基础。