CD45RO N-糖基化位点对galectin-3结合CD45RO突变体转染细胞的影响

• 作者: 傅春燕 薛婧 高锡强 魏强
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 医学
• 关键词: 半乳糖凝集素-3 结合 N-糖基化位点 CD45RO Jurkat T细胞
• 年，卷（期）: 2013,（9）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1165-1170
• 页数: 6页
• 分类号: R392.11
• 字数: 2352字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建CD45RO不同N-糖基化位点突变的T细胞株,并检测其与galectin-3的结合情况.方法 采用N→Q定点突变技术分别去除CD45RO的11个N-糖基化位点,制备单个N-糖基化位点缺失的CD45RO,然后将其导入慢病毒表达载体pWPXL中,11个携带单个N-糖基化位点缺失的CD45RO重组慢病毒质粒与慢病毒包装质粒psPAX2和MD2.G共转染293T细胞,将包装重组慢病毒感染CD45-的J45.01细胞,流式分选后获得11株分别表达CD45RO单个N-糖基化位点缺失的J45.01 T细胞株.通过RT-PCR和流式细胞术分别从RNA水平和蛋白水平验证CD45RO突变体的转录和表达,应用流式细胞术检测CD45RO突变细胞株与galectin-3的结合情况.结果 成功构建了1 1个CD45RO单个N-糖基化位点缺失的T细胞株,各突变细胞株能稳定表达突变基因,经测序再次证实突变位点正确,CD45 RO突变体能稳定表达于细胞表面.galectin-3与N327Q突变细胞的结合明显增强,与N36Q突变细胞和N217Q突变细胞的结合明显减弱.结论 CD45RON-糖基化位点对galectin-3与CD45 RO-J45.01细胞的结合有调节作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	薛婧	北京协和医学院中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室	1	1	1.0	1.0
2	高锡强	北京协和医学院中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室	1	1	1.0	1.0
3	傅春燕	北京协和医学院中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室	1	1	1.0	1.0